Akcja toczy się w fikcyjnym świecie, gdzie duchy i magiczne istoty są częścią rzeczywistości. W trakcie nocy letniej na scenie pojawiają się m.in. król elfów i królowa wróżek, którzy intrygują się ludzkimi emocjami i uczuciami.

Jedną z par są Hermia (grana przez aktorkę Lili Taylor) i Lysander (grany przez aktora Dominica Westa), którzy są zakochani w sobie, ale ich miłość jest zakazana przez ojca Hermii. Inna para to Helena (grana przez aktorkę Calistę Flockhart), która jest zakochana w Demetriusie (grany przez aktora Christiana Bale'a), ale ten ją odrzuca na rzecz Hermii. Trzecią parę tworzą Tytania (grana przez aktorkę Michelle Pfeiffer), królowa wróżek, i jej mąż Oberon (grany przez aktora Ruperta Everetta), król elfów, którzy toczą spór między sobą.

W trakcie nocy letniej ich losy splatają się w lesie, gdzie dochodzi do różnych komicznych sytuacji, a także zawiązują się nowe i niespodziewane romanse. Wszystko to pod okiem duchów i magicznych istot, które manipulują ludzkimi emocjami.

Film Sen nocy letniej to romantyczna, komiczna i magiczna opowieść o miłości i ludzkich emocjach, w której sztuka Szekspira została z powodzeniem przeniesiona na ekran.